9、3D造就已毕后基质胶可能温和消融,并保存3D细胞/类器官布局完善性;
Biozellen®3D类器官造就基质胶套装包罗全套胶体试剂与熔化试剂,可举办3D类器官造就与微境况等合联试验行使; 本试剂盒操作方便且可调控胶体硬度举办多品种器官造就测试;高分子胶体可迅疾造成水凝胶, 倡议操作此造就胶体详读此行使指南。

C缓冲溶液(1X)造备:行使将10X C缓冲溶液用冰的无细胞造就液(比如: 无血清DMEM、opt-MEM) 造备成 1X C 缓冲溶液。(不要用 PBS 稀释 C 缓冲液) .
注:请采选合适的造就溶液与前提举办试验,贴壁细胞应正在~80% 汇合度下造就。
3.取 20-40 微升次序 2 含细胞的混杂 A 胶溶液滴于 次序 1 预冷的造就板上,胶体将于 5 分钟内成胶。 注: 测试胶体是否成胶,可用微量吸管尖温和的触碰胶体表观举办确认。
4.待胶体成胶后,增加1毫升冰的1X C缓冲溶液,并盖过次序3 的胶溶液,固定 15 分钟。
5.待15分钟固定后,幼心的接收 C 缓冲溶液并置换为适合此细胞发展之造就基溶液。
6将含有细胞的胶于37°C 二氧化碳造就箱内举办7~14天的造就,并张望细胞球体的造成,按平常造就基调动频率举办调动操作。
幼心的将 1X PBS 接收移除,并增加 1 毫升冰的D缓冲溶液,盖过胶滴于室温反响 5分钟。
将含有细胞球体的溶液吸入1.5 毫升离心管,用1000 rpm的转速离心10分钟,移除上清液体并搜集细胞球体做阐述。
3. 待细胞球体齐备剖析,参加3倍体积的1X PBS,并用1000转的转速举办离心10分钟,并移除上清液体搜集重淀的单细胞做阐述。


D Buffer熔化分手后如故可能获得完善的3D细胞布局返回搜狐,查看更多